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植物基因組DNA快速提取試劑

簡(jiǎn)要描述:植物基因組DNA快速提取試劑 特*配方的植物 DNA 抽提液(添加多種針對植物特點(diǎn)的多糖、多酚去除成份)迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶

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  • 更新時(shí)間:2024-06-11
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植物基因組DNA快速提取試劑

特*配方的植物 DNA 抽提液(添加多種針對植物特點(diǎn)的多糖、多酚去除成份)迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶,只需一步離心即可去除多糖、多酚和蛋白,取上清所得基因組 DNA 用異丙醇沉淀,再通過(guò)乙醇漂洗等步驟得到純凈的 DNA。

注意事項(實(shí)驗前請首先閱讀這部分?。?.所有的離心步驟均在室溫完成,使用離心力可以達到13,000×g 的高速離心機。2.開(kāi)始實(shí)驗前將需要的試劑水浴先預熱到65℃備用,Rnase A(10mg/ml)請自備,TE或者無(wú)酶水請自備。3.不同來(lái)源的植物組織材料中提取的DNA 的量會(huì )有差異,一般100mg新鮮組織典型產(chǎn)量可達3-25ug。4.可以按比例放大提取的體系。 

操作步驟* 將 DNA 提取試劑放置在 65℃預熱。1.加熱 DNA 提取試劑到 65℃。2.取50-100 mg植物新鮮組織或30mg干重組織在研缽中加入液氮充分碾磨成細粉,或用研磨儀研磨(可以加入預熱的 DNA 提取試劑研磨)。3.轉移細粉到一個(gè) 1.5 ml 離心管中,加入 1ml~1.2ml 預熱好的 DNA 提取試劑,再加入 10ul RNase A 劇烈渦旋振蕩混勻 1 分鐘,65℃水浴 30分鐘。4.將離心管轉入離心機中 13,000×g 室溫離心 3 分鐘。下面有兩種抽提方法:1)無(wú)酚氯仿提取法:a.小心吸取 800ul 上清到一個(gè)新的 2ml 離心管,注意不要吸到界面物質(zhì),加入 1.2ml 異丙醇混合均勻,13,000×g 離心 2 分鐘。b.小心倒掉上清,注意不要倒掉沉淀,加入 1ml 的 70%乙醇震蕩漂洗DNA,13,000×g 離心 2 分鐘沉淀 DNA,棄上清。c.重復步驟 b。d.用槍盡可能吸取多余的乙醇(注意不要將沉淀的 DNA 吸走),室溫晾 2 分鐘左右使乙醇揮發(fā),加入 100ul TE 溶解 DNA??赡軙?huì )有部分沉淀無(wú)法溶解,可以離心后取上清。e.DNA 可以存放在 2-8℃,如果要長(cháng)時(shí)間存放,可以放置在-20℃。2)酚氯仿提取法:a.轉移第 4 步 800ul 上清到一個(gè)新的 2ml 離心管,加入等體積的酚:氯仿:異戊醇=25:24:1 的混合液,渦旋振蕩 1min,室溫放置 5min。b.13000×g 離心 2 分鐘,小心吸取上清到一個(gè) 2ml 離心管,注意不要吸到界面物質(zhì),與等體積異丙醇混合均勻,13,000×g 離心 2 分鐘。c.小心倒掉上清,加入 1ml 的 70%乙醇漂洗 DNA,13,000×g 離心 2分鐘。d.重復步驟 c。e.用槍盡可能吸取多余的乙醇,室溫2分鐘左右使乙醇揮發(fā),加入100ulTE 溶解 DNA。f.DNA 可以存放在 2-8℃,如果要長(cháng)時(shí)間存放,可以放置在-20℃。

保存條件:室溫

本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途


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