簡(jiǎn)要描述:快捷型植物基因組 DNA 提取試劑盒 本試劑盒采用*特的緩沖液系統,特別適合從植物干粉或者新鮮植物材料中提取 基因組 DNA
詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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應用領(lǐng)域 | 醫療衛生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
快捷型植物基因組 DNA 提取試劑盒
適用范圍:植物 DNA 提取試劑盒組分:Buffer FA 80mlBuffer FB 28mlBuffer GE 20mlRnase A(10 mg/ml) 1.2ml
保存條件:Buffer GE 4°CRnase A 4°C其它組分室溫保存
本試劑盒采用特*的緩沖液系統,特別適合從植物干粉或者新鮮植物材料中提取 基因組 DNA。無(wú)需酚/氯仿抽提,使用安全方便,可***限度去除雜質(zhì)蛋白及細胞中 其他有機化合物。對樣品的起始重量沒(méi)有限制,實(shí)驗者可根據自己的需求靈活調整。
提取的基因組 DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩定可靠。 使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規操作,包括酶切、PCR、文庫構建、 Southern雜交等實(shí)驗。
產(chǎn)品特點(diǎn)簡(jiǎn)單快速:1h 內即可獲得超純的基因組 DNA。廣泛:適用于各種植物組織。超純:獲得的 DNA 純度高,可直接用于 PCR、酶切、雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗。
注意事項1.樣品應避免反復凍融,否則會(huì )導致提取的 DNA 片段較小且提取量也下降。2.Buffer FA 可能會(huì )發(fā)黃,并不影響提取效果。3.若緩沖液 FA 或 FB 有沉淀析出,可在 37℃水浴溶解,搖勻后使用。4.所有離心步驟均為使用臺式離心機,室溫下離心。操作步驟1.取植物新鮮組織 100 mg 或干重組織 20 mg,加入液氮充分碾磨。加入 400ul Buffer FA 和 6ul 的 Rnase A(10 mg/ml),旋渦振蕩 1min,室溫放置 10min。注意:由于植物材料多樣性非常豐富,所取實(shí)驗材料的最適量需根據材料的不同,或相同材料的不同組織等進(jìn)行摸索。。2.加入 130ul Buffer FB,充分混勻,渦旋振蕩 1min。3.14,000×g 離心 3min,將上清轉移至新的離心管中。4.將上清液再次 14,000×g 離心 5min,將上清轉移至新的離心管中。注意:此步驟目的為去除上清液中的沉淀雜質(zhì),使提取基因組 DNA 純度更高。5.向上清液中加入 0.7 倍體積的異丙醇,充分混勻,此時(shí)會(huì )出現絮狀基因組 DNA。(例如 500ul 的上清液加 350ul 異丙醇),13,000×g 離心 2 min,棄上清,保留沉淀。6.加入 600ul 70%乙醇,渦旋振蕩 5sec,13,000×g 離心 2 min,棄上清。7.重復步驟 6。8.開(kāi)蓋倒置,室溫 5-10 min,晾干殘余的乙醇。注意:乙醇的殘留會(huì )影響后續的酶反應(酶切、PCR 等)實(shí)驗。9.加入適量 Buffer GE,65℃水浴 10-60 min 溶解 DNA,其間顛倒混勻數次助溶。最終得到 DNA 溶液。DNA 濃度及純度檢測得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中的剪切力等因素有關(guān)?;厥盏玫降?DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA 應在 OD260 處有顯著(zhù)吸收峰,OD260 值為 1相當于大約 50ug/ml雙鏈 DNA、40 ug/ml 單鏈 DNA。OD260/OD280 比值應為 1.7-1.9,如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液,而使用 ddH2O,比值會(huì )偏低,因為 pH 值和離子存在會(huì )影響光吸收值,但并不表示純度低。
本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途
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