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關(guān)于細胞分離試劑盒

更新時(shí)間:2023-12-22      點(diǎn)擊次數:741

過(guò)研究體內組織來(lái)源的細胞,可以對細胞的生物學(xué)和功能進(jìn)行有效的預測,但這需要對靶標細胞群體進(jìn)行分離,否則生物學(xué)的復雜性可能導致結果混淆。為了對細胞表型進(jìn)行研究,目前已開(kāi)發(fā)出多種基于明確特征對細胞群體進(jìn)行分離的不同方法。對細胞群體進(jìn)行分離不僅有助于生物學(xué)研究,而且也能促進(jìn)臨床上的診斷性檢測。有效的分離方法應具備出色的產(chǎn)量、純度和活力??赏ㄟ^(guò)正向選擇(通常采用結合細胞特異性標志物的抗體)或負向選擇(基于生物物理特性將不需要的細胞進(jìn)行去除從而富集靶標細胞群體)來(lái)實(shí)現對靶標細胞群體的富集或純化。

長(cháng)期以來(lái),將細胞分離成各種亞細胞成分一直都是細胞生物學(xué)研究的基礎。亞細胞分離技術(shù)已廣泛用于研究細胞器和亞細胞區室的結構和功能,以及了解生物分子的定位、加工和運輸。大多數分離技術(shù)都旨在獲得處于功能性狀態(tài)的細胞器和細胞大分子,此時(shí)它們仍保留其固有的生化特性。這通常通過(guò)采用溫和的機械方法或使用溫和的去污劑進(jìn)行細胞裂解,然后通過(guò)差異離心將細胞成分進(jìn)行分離來(lái)實(shí)現。

基于表型的細胞分離

為了評估脂質(zhì)裂解、細胞信號轉導、內分泌功能和代謝活性,可以使用前脂肪細胞來(lái)研究脂肪形成和分化后的過(guò)程。

我們的前脂肪細胞分離試劑盒包含了從脂肪組織中分離基質(zhì)血管細胞成分所需的工具和試劑。所得到的基質(zhì)血管成分將會(huì )培養在前脂肪細胞所粘附的組織培養板上。前脂肪細胞保留了增殖以及在使用誘導分化成分處理時(shí)可分化為脂肪細胞的能力。

細胞器和亞細胞復合物的分離

亞細胞成分的衍生可促進(jìn)對細胞器功能的理解,并催生新的生物技術(shù)。例如,從哺乳動(dòng)物細胞中分離出的細胞核可后續用于合成內源性RNA初級轉錄本。我們已開(kāi)發(fā)出了高產(chǎn)量的Nuclei EZ Prep試劑盒,可快速分離出大多數哺乳動(dòng)物的細胞核。

為了檢測線(xiàn)粒體的完整性和膜電位,我們的線(xiàn)粒體染色試劑盒使用了JC-1染料,其會(huì )集中在線(xiàn)粒體基質(zhì)中并形成紅色熒光團。細胞凋亡等能夠消耗線(xiàn)粒體膜電位的事件會(huì )阻止JC-1染料在線(xiàn)粒體中的積累,因此可利用熒光顯微鏡來(lái)區分具有活力的線(xiàn)粒體和受損的線(xiàn)粒體。

另外,也可分離非細胞器的亞細胞復合物(如蛋白酶體),將其用于蛋白水解測定。我們使用含有一段GST融合蛋白的親和基質(zhì)微珠進(jìn)行分離,該融合蛋白具有可與GST-瓊脂糖結合的泛素樣結構域。

細胞骨架富集

傳統上,研究與肌動(dòng)蛋白細胞骨架相關(guān)的蛋白都很棘手,因為細胞骨架元素不溶于類(lèi)似于Triton X-100的去污劑。Millipore ProteoExtract細胞骨架富集和分離試劑盒帶有細胞骨架純化緩沖液,能夠保留粘著(zhù)斑和肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白并同時(shí)從細胞中去除可溶性細胞質(zhì)和核蛋白。該方法可增強檢測并研究低豐度肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白的能力,而這些蛋白在使用Western blotting分析全細胞裂解物時(shí)通常會(huì )被掩蓋掉。



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